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0一、线粒体基础知识 1、什么是线粒体？ 线粒体是一种双膜结构的细胞器，分布在几乎所有真核细胞中。它们负责将营养物质转化为化学能量（ATP），供细胞使用。 2、为什么说它是“半自主性”的？ 线粒体拥有自己的DNA和遗传体系，但与细菌类似，它们的基因组有限。除了某些特定的基因，大部分线粒体的蛋白质由细胞核DNA编码，在细胞质中合成后运输到线粒体内。 3、线粒体有哪些功能？ 除了能量转换，线粒体还参与细胞分化、信号转导、细胞周
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0人的一生会经历6个健康转折点 让我们开始面对更多的健康隐患那么面对健康的转折，我们又该如何应对呢？ 首先，先定一个能达到的小目标！你是不是希望自己 30岁骨骼健康、40岁血管通畅50岁癌症不来、60岁目光炯炯70岁肌肉不萎缩、80岁老年不痴呆 那么首先了解清楚人生的6个转折点让我们在保卫健康的道路上不走弯路 30岁之后，骨量开始减少 如果把骨骼代谢比做银行存储的话，骨形成就好比存钱，骨吸收就好比花钱。20岁时基本上达到最高骨量的
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000000000000病理实验技术 简易实验步骤来啦 病理组实验过程 病理学技术（组织标本切片和染色技术）是组织学、病理学等学科用于观察和研究组织与细胞的正常形态及病理变化的常用方法。 什么是组织制片技术及其目的？ 组织经过固定、切片和染色后，光波通过被检组织成分时，波长和振幅发生改变，在显微镜下能清晰的观察其组织结构，称之为光镜标本的基本制作方法或称为组织制片技术。 目的生物学标本在生活状态下多为无色透明，而且组织一旦离开机0在所有RNA实验中，最关键的因素是分离得到全长的RNA。而实验失败的主要原因是核糖核酸酶（RNA酶）的污染。由于RNA酶广泛存在而稳定，一般反应不需要辅助因子。因而RNA制剂中只要存在少量的RNA酶就会引起RNA在制备与分析过程中的降解，而所制备的RNA的纯度和完整性又可直接影响RNA分析的结果，所以RNA的制备与分析操作难度极大。 在实验中，一方面要严格控制外源性RNA酶的污染；另一方面要最大限度地抑制内源性的RNA酶。RNA酶可耐受多种处理而不0载体 在Cohen和Boyer的实验中，两种质粒都能在E. coli中复制。因此，这两种质粒都可以作为载体，使重组DNA得以复制。所有基因克隆实验都需要这样的载体，我们称之为载体（Vector），但典型的基因克隆实验只涉及一个载体，以及一个依赖于载体进行复制的外源DNA片段。外源DNA没有复制起点，即DNA复制开始的地方，因此除非将其放入具有复制起点的载体中，否则它无法复制。自20世纪70年代中期以来，已经开发了许多载体；这些载体分为两大类：质粒（pl00000我知道两个都是变性，但没太理解0物质对光吸收的定量关系很早就受到科学家的注意并进行了研究，19世纪 50年代有关光吸收的基本定律——朗伯-比尔定律应用于定量分析化学领域，于 1918 年生产出第一台紫外可见分光光度计。随着光学设计以及电子学技术的发展，研究人员不断设计新的软件。紫外可见分光光度计得到不断改进，不仅增加了快速扫描等功能，而且降低了仪器的使用难度，其灵敏度、准确度、相关软硬件设施性能均得到不断提升，应用范围也不断扩大，已成为实验室必0抗体是一种由浆细胞（效应B细胞）分泌，被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质，仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中，及其B细胞的细胞膜表面。抗体能识别特定外来物的一个独特特征，该外来目标被称为抗原。 1. 做流式的抗体和免疫组化的抗体是一样的吗? 不一定能通用。流式是用直接标记还是间接标记?如果是直接标记的话，那这个抗体一般不是FITC标记或者就是TRITC，PE之类的。如果恰好你的免疫组化，也是想用00免疫荧光染色是实验室常用的技术之一，但在操作过程中，有许多需要注意的细节，任何一个环节的失误都可能导致实验失败。本文将为您介绍免疫荧光染色的注意事项，并附上零失误封片技巧。 1. 抗体选择：选择针对您研究的目标蛋白特异性高、亲和力强的抗体，一抗的浓度需要预实验摸索。一抗浓度过高(本身荧光实验，一抗的浓度就较高)，也是造成自发荧光强的重要原因。 2. 抗体稀释：根据抗体说明书建议，使用合适的稀释液和稀释比例进行000脾细胞是ELISpot和FluoroSpot测定中使用最多的细胞，至少对小鼠和大鼠样本而言是如此。脾细胞可以很容易地从脾脏中分离出来，而不需要Ficoll分离。细胞可以在分离后直接使用，也可以冷冻保存，并在以后批量使用。 下面是编译自https://www.mabtech.com/knowledge-hub/isolation-freezing-and-tha的关于如何最好地（i）分离、（ii）冻存和（iii）复苏脾细胞的详细指南。 脾细胞的分离 材料 细胞过滤器，70µm尼龙，无菌 无菌剪刀和镊子或镊子 无菌培养皿 巴氏移液管，无000000PVDF膜使用时要用甲醇浸泡？ PVDF本质是一种疏水性的聚合物，在水溶液中不会浸湿。为了在水性缓冲液使用PVDF膜，首先必须将其浸泡在50%醇溶液中。甲醇、乙醇和异丙醇都适合浸泡这种膜。之后必须用水反复冲洗以去除醇类，经预处理的膜现在可以直接放入转印缓冲液中平衡。 PVDF膜浸泡步骤？ 湿转： (1) 将膜在甲醇中浸泡30秒。膜应均匀的从不透明变成半透明。 (2) 小心的将膜放入双蒸水中，浸泡2分钟。 (3) 小心的将膜放入转印缓冲液中，至少平衡50荧光原位杂交（Fluorescence in situ hybridization FISH）是一门新兴的分子细胞遗传学技术，是 20 世纪 80 年代末期在原有的放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性原位杂交技术。目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色体精细结构变异分析、病毒感染分析、人类产前诊断、肿瘤遗传学和基因组进化研究待许多领域。 FISH的基本原理是用已知的标记单链核酸为探针，按照碱基互补的原则，与待检材料中未知的单链核酸进行异性00CCK-8是一种广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的细胞生物学实验。CCK-8 溶液可以直接加入到细胞样品中，不需要预配各种成分。细胞增殖越多越快，细胞颜色越深，证明毒性小；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅 (生成的 formazan 量) 和细胞数，目呈线性关系。 实验材料及试剂 细胞，96孔细胞培养板、CO2培养箱、酒精灯、微量移液器、酶标仪、CCK-8试剂盒等。 实验步骤 1. 取生长状态良好的细胞制备成一定浓度的细胞悬液，每孔100ul01 抗生素原理 现代实验室研究的细胞多以原核细胞、真核细胞为主，为了独立研究某类细胞，需要抑制其他类型细胞的增殖，例如养293T时加青霉素/链霉素，抑制潜在的原核细菌增殖，但又不影响293T的功能。 那抗生素是什么机制呢？这个首先了解一个细菌或者细胞想要存活，需要以下条件正常进行： DNA复制：在DNA聚合酶作用下，DNA自身得到复制，有丝分裂时每个细胞一套DNA； 转录、RNA形成过程：在RNA聚合酶催化下，以DNA模板链合成RNA的过程，产生mRN共 4 张0液氮罐的定义 采用真空绝热保温技术制作的容器，放液氮于其中，利用液氮常压下沸点-196℃的原理，实现生物样本长时间低温保存的设备。 液氮罐的分类 根据液氮罐的不同指标，液氮罐有不同的分类。 按用途分 按用途分，可以分为液氮存储罐和液氮运输罐两种。其中液氮存储罐适合于不同容量长时间的稳定存储，罐体不能用来运输，运输存在安全隐患。液氮运输罐具有体积小和减震结构设计，适用于少量样本的转移存储和短距离运输使用。 按液000细胞裂解液的目的： （1）利用去垢剂破坏脂质双分子层，破裂细胞； （2）溶解蛋白； （3）蛋白变性使其稳定； （4）抑制蛋白酶活性。 常见的细胞裂解液成分： 50mM Tris-HCl pH7.4 （缓冲体系） 150mM NaCl （等渗体系） 1mM PMSF （蛋白酶抑制剂） 1mM EDTA （变性剂和稳定剂） 5μg/ml Aprotinin （蛋白酶抑制剂） 5μg/ml Leupeptin （蛋白酶抑制剂） 1% Triton X-100 （弱变性剂） 1% Sodium deoxycholate （中度变性剂和溶解剂） 0.1% SDS （强变性剂和溶解剂） 细胞裂解液的一般0PVDF膜使用时要用甲醇浸泡？ PVDF本质是一种疏水性的聚合物，在水溶液中不会浸湿。为了在水性缓冲液使用PVDF膜，首先必须将其浸泡在50%醇溶液中。甲醇、乙醇和异丙醇都适合浸泡这种膜。之后必须用水反复冲洗以去除醇类，经预处理的膜现在可以直接放入转印缓冲液中平衡。 PVDF膜浸泡步骤？ 湿转： (1) 将膜在甲醇中浸泡30秒。膜应均匀的从不透明变成半透明。 (2) 小心的将膜放入双蒸水中，浸泡2分钟。 (3) 小心的将膜放入转印缓冲液中，至少平衡500衰老细胞曾经一度被认为是“僵尸细胞”：不会增殖也不会死亡，它们只是停留在组织中，通过代谢从微环境中吸收营养物、输送废弃物； 但近些年的研究发现，衰老细胞其实非常活跃而且很“聪明”：它能够通过自我调整来“逃避追踪”，使用特定的蛋白来灭活免疫细胞，从而逃脱免疫系统监控。 在1997年Serrano等人发现了衰老是一种肿瘤的抑制程序，自此打开了关于肿瘤中细胞衰老研究的新世界！ 肿瘤细胞衰老研究方向 目前关于肿瘤中细胞衰老的共 14 张0
