AlphaFold 2(AF2)的问世引发了蛋白质结构及其相互作用建模的革命，使得在蛋白质建模和设计领域有了广泛的应用。 Google DeepMind and Isomorphic Labs团队在5月8日Nature的最新论文“Accurate structure prediction of biomolecular interactions with AlphaFold3”描述了最新推出的AlphaFold 3 (AF3)模型，采用了一个大幅更新的基于扩散的架构，能够联合预测包括蛋白质、核酸、小分子、离子和修饰残基在内的复合物的结构。 新的 AlphaFold 模型在许多先前专门工具上显著提高了准确性：在

CoIP-Mass和CoIP-WB应用场景： CoIP-Mass：用于构建目的蛋白的蛋白互作组数据，或用于不同遗传背景/实验条件下的互作组差异。 CoIP-WB：用于验证目的蛋白和候选蛋白的相互作用关系，或用于不同遗传背景/实验条件下的互作变化。 CoIP-Mass是一种检测细胞内蛋白/蛋白互作组的高通量技术。该技术通过联合免疫共沉淀技术和质谱检测技术对目的蛋白在特定细胞/组织内的互作蛋白，进行系统的检测和分析。该技术适用于目的蛋白在特定细胞/组织中的蛋白互作

一．碘化丙啶简介 碘化丙啶（Propidium iodide）是一个小分子芳香化合物，通常在研究和开发中作为荧光核酸结合染料。PI通常用于区分活细胞与凋亡细胞和坏死细胞,因为它可以自由渗透死亡或损伤细胞膜,而不能进入正常活细胞。碘化丙啶能染色核酸，如DNA和RNA，因此可用作流式细胞仪、原位杂交和免疫组织化学应用中细胞膜完整性的指示剂。 在样品中加入碘化丙啶后，细胞膜可逆性损伤的细胞将发出红色荧光。通过这种方式，碘化丙啶能够快速且可

新手，不管是5微还是7.5微marker跑出来都很暗，然后点的样品5微，是不是没跑开，做几次还是这样，找不到原因

简介： 两个大分子间的共价结合,比如抗体与酶或者酶与DNA,是研究人员一项重要的任务。有几种方法可用于交联两种生物大分子。常用的一种方法是使用小型交连剂(如磺化-SMCC)。SMCC的一端有一个胺反应性NHS酯基团,可与蛋白质上的自由胺(-NH2)发生反应;另一端有一个硫基反应性的马来酰基团,可与待连接生物大分子上的硫基(-SH)发生反应。由于蛋白质通常包含自由胺和硫基两种官能团,SMCC修饰的连接剂极不稳定且容易自反应,导致大量同型交联反应。此外,

实验小白最近在做crispr的质粒的构建，用的是Dongdong Zhao构建的pRed_Cas9_∆poxB300单质粒，但现在有个问题解决不了，就是N20的插入。我看别人的插入都是在gRNA启动子之后和gRNA之前有两个酶切位点，通过双酶切来插入，但我这个质粒只有一个BglⅠⅠ酶切位点，求大佬告知怎样插入N20为好。谢谢大佬

如题，感谢感谢

5分钟学会如何设计PCR引物 查找目的基因序列并不能直接用于我们研究所用，因为查找到的基因序列只能算是基因的电子序列，并不是我们研究要用的现实中的序列，如何获得现实的基因序列呢？这就需要我们根据基因的电子序列来设计引物了，通过引物借助PCR方法才能获得我们的目的基因序列。接下来，我们将介绍一下PCR方法并讲述如何设计引物。 PCR（polymerasechainreaction），即聚合酶链反应，又称基因体外扩增技术，是由一对引物介导、能在体外对

细胞系和细胞株是细胞生物学中常用的两个概念，它们在研究细胞的生理、生化、遗传和分子生物学等方面起到了重要的作用。尽管两者相似，但实际上有明显的区别。 我们先来看看细胞系（cell line）的定义。细胞系是指从原始组织或细胞中通过培养和传代培养等方法获得的由同一种细胞组成的细胞群体。简单来说，细胞系是通过将原始细胞进行一系列培养和传代培养过程，使其能够持续增殖并具有某些特定的性质或表达某些特定的基因。 与细胞系

鸡红细胞悬液冻成块了还能用吗？

随着免疫治疗的深入发展，展示了其在肿瘤治疗方面的巨大应用前景，因此肿瘤免疫方向也成为近年来国自然项目申请的热点之一。然而临床应用上也面临着多种新挑战，肿瘤免疫逃逸、免疫应答效率等问题尤为突出。越来越多的研究表明，巨噬细胞在肿瘤免疫应答、免疫逃逸等方面发挥着重要作用。然而，巨噬细胞不仅存在着组织特异性，还有更加细的分类，本文就巨噬细胞在促进肿瘤进展、免疫逃逸方向做一下粗浅的思路，给没有做过巨噬细胞相

动物实验 在动物实验中，药物通常会以溶液（solution）或悬浮液（suspension）的形式给药。溶液是指两种或以上物质的均匀液体混合物，溶液中的成分不容易被分离；悬浮液指多种物质的多项液体复合物，通常有容易发生沉淀的固体颗粒分散在液体成分中。在动物给药时，溶液和悬浮液都可以作为溶剂使用，但是为了减少栓塞现象，静脉注射的时候必须保证基本无颗粒状态。 1、溶解度较好的水溶液 水溶液与动物的生理环境更为接近，动物实验中所给

载体4.4k，目的基因是易错pcr的产物1.4k，载体和目的基因都经过双酶切3个小时，然后胶回收，载体浓度10ng/微升，目的基因14ng/微升，之后按照物质的量比1:6进行连接，t4连接酶过夜，然后做转化，感受态是买的trans10，完全不长菌啊，求助

有没有大佬会做单倍型系统发育树的啊，小白求带，急

1、DAP-seq 在基因组水平上，鉴定转录因子的结合位点（transcription factor binding sites, TFBS）非常重要。ChIP-seq是进行体内检测TFBS的主要方法。然而，ChIP-seq依赖于抗体质量，这对低表达的蛋白质具有很大的挑战性。所以，ChIP-seq通常在规模上受到限制，难以进行高通量扩展。因此，只有少数转录因子可以获得结合位点信息，大量TFBS的覆盖范围仅适用于人类和一些模式生物。 DAP-seq具有与ChIP-seq同样的功能。通过体外蛋白表达技术，表达出带有标签的转录因

最近在做DAP-Seq，有没有大佬啊，小白求带

高灵敏度荧光的DNA定量试剂盒针对CytoCite和Qubit荧光分析仪进行了优化。DNA定量是用于各种基因组分析的DNA样品制备中非常重要的。 这种Portelite dsDNA定量试剂盒提供了一种使用手持式荧光分析仪使用Helixyte Green探针定量dsDNA的快速方法。 它针对Cytocite 和Qubit 荧光计进行了优化。 Portelite dsDNA定量分析线性超过五个数量级。 该测定法对RNA上的双链DNA（dsDNA）具有高度选择性，并且设计为对于25pg / uL至100ng / uL的初始样品浓度是准确的。 Helixyte Green在与dsDNA结

愁死了，提了两天了，天根试剂盒，海洋动物组织。

我设计一组基因的QPCR引物，使用primer5软件，分值啥的都还好，然后我去NCBI验证，出来的结果总是有两条或以上不同的基因完全匹配，而且完全匹配的基因我blast相似度也不是百分百，一般百分之九十四左右，我也不能确定是相同基因的不同版本。我怎么调参数都还是这死样子，请问有没有懂的人一般怎么解决这种问题啊 后面是我设计引物的界面和验证的界面

一.胱天蛋白酶Caspase8抑制剂Ac-TETD-CHO概述 半胱氨酸蛋白酶在细胞凋亡或程序性细胞死亡中是必需的，在发育和成年生活的大多数其他阶段，并且因其在细胞中的作用而被称为“刽子手”蛋白质。免疫系统中也需要一些半胱天冬酶用于淋巴细胞的成熟。细胞凋亡失败是肿瘤发展和自身免疫疾病的主要原因之一。半胱天冬酶也参与缺血和阿尔茨海默病。凋亡caspase有两种类型：引发剂和效应剂。 启动子半胱天冬酶（例如，CASP2，CASP8，CASP9和CASP10）切割效应

RT-qPCR rtpcr qpcr pcr 实时荧光定量pcr，设计引物、提取RNA、逆转录、RT-q PCR（可以做B标、标准曲线，也就是相对定量和绝对定量）。 引物设计+提取RNA+逆转录+RT全套服务

荧光定量 PCR 的主要用途之一是对RNA进行相对定量分析，而提到相对定量，必然离不开内参，那什么是内参基因？为什么相对定量必须使用内参基因？如何选择合适的内参基因？今天，小助手聊聊实验室遇到的内参那些事。 一、什么是内参基因？ 内参基因，也称为管家基因，即是内部参照，它们在各组织和细胞中的表达相对恒定，在检测基因的表达水平变化时常用它来做参照物。所以叫内参基因。其作用是校正上样量、上样过程中存在的实验误差，

WB：蛋白质印迹是生命科学实验中一项常见的分子生物学实验技术，原理为利用电泳（SDS-PAGE）分离蛋白质，接着将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法，通过分析条带大小和显色信号获得目标蛋白质在所分析的细胞或组织样本表达情况的信息。由于蛋白质进行电泳前进行加热变性，破坏了保持蛋白质二级和三级结构的氢键，并使蛋白质线性化，需使用识别线性抗原表位的抗体。因此WB抗体一般采用人工合成多肽作为抗原制备的抗体。 IF/IH

ATTO 532 NHS脂是一种基于罗丹明的荧光标记染料，具有高分子高消光系数和荧光量子产率（0.90）以及足够的斯托克斯位移（激发大532 nm，发射大值553 nm）。该染料还具有较好的光稳定性。它采用倍频Nd：YAG激光进行激励优化。ATTO 532 NHS酯用于标记含氨基的分子，如蛋白质，肽和氨基修饰的寡核苷酸。 图1.ATTO532 NHS脂是将ATTO染料与肽，蛋白质、抗体、氨基修饰的寡合苷酸或核算结合的最常用工具。NHS脂很容易与蛋白质的一级胺(R-NH2)、胺修饰的寡合苷酸和

课时1：第一节-SCI简介及写作顺序 课时2：第2节（上）-Figure and table课时3：第2节（下）-Figure and table 课时4：第3节-Figure legend课时5：第4节-Results 课时6：第5节-Introduction课时7：第6节-Discussion 课时8：第7节-The Methods课时9：第8节-Reference 课时10：第9节-Abstract课时11：第10节-Title 课时12：第11节-实在憋不出来怎么办课时13：第12节-SCI论文语法易错总结 课时14：第13节-SCI论文写作语句链接课时15.如何选刊 课时16.投稿须知Author Instruction解读（上）课时17.投稿须知Aut

低血清培养基中酚红的含量与普通培养基中的酚红含量不同，不能通过肉眼观察或通过经验来判定pH值，建议使用pH计进行测定。

1.百萤 胱天蛋白酶Caspase9荧光底物(Ac-LEHD)2-R110绿基本参数 Ex(nm) 500 Em(nm) 522 分 子 量 1403.41 溶 剂 DMSO 存储条件 在-15℃以下保存，避光防潮 2.百萤 胱天蛋白酶Caspase9荧光底物(Ac-LEHD)2-R110绿简介 胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物(Ac-LEHD)2-R110 绿是美国AAT Bioquest生产的荧光底物，(Ac-LEHD)2-R110是Caspase 9的荧光底物。因为高纯的罗丹明110(R110)衍生底物被置于内酯的构型内，因此是无色的，也不发出荧光。在Caspase蛋白酶（天冬氨酸蛋白水解酶或胱冬肽酶）的作用下，切割R

一、胱天蛋白酶Caspase 3/7显色底物 Z-DEVD-pNA工作原理 胱天蛋白酶Caspase 3/7显色底物 Z-DEVD-pNA是美国AAT Bioquest生产的荧光底物，一种含有苄氧羰酰基(Z)的Caspase 3显色底物，一种蛋白酶，当细胞暴露在细胞凋亡的条件下时具有快速催化活性；会切断多聚(ADP-ribose)聚合酶。这种七-氨基-4氟甲基香豆素衍生物比七-氨基-4甲基香豆素衍生物具有更好的膜渗透性。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的胱天蛋白酶Caspase 3/7显色底物 Z-DEVD-pNA。 胱天蛋白酶C

复习过程中分子生物学有关的疑难杂症集合帖。 教材《药学分子生物学》（人卫5版 张景海主编）

1.百萤 胱天蛋白酶Caspase3/7荧光底物Ac-DEVD-AFC 绿简介 胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物Ac-DEVD-AFC 绿是美国AAT Bioquest生产的荧光底物，半胱氨酸蛋白酶在细胞凋亡或程序性细胞死亡中是必需的，在发育和成年生活的大多数其他阶段，并且因其在细胞中的作用而被称为“刽子手”蛋白质。免疫系统中也需要一些半胱天冬酶用于淋巴细胞的成熟。细胞凋亡失败是肿瘤发展和自身免疫疾病的主要原因之一。半胱天冬酶也参与缺血和阿尔茨海默病。凋亡caspase有两种类

请问各个实验室哪里有pCymMV-Gateway和pSTARGATE载体~~ 跪求 交换或者买都可以

1. 百萤 钙紫蓝素450 CytoCalcein 450nm激发工作原理 钙紫蓝素450 CytoCalcein 450nm激发 用于和钙黄绿素 AM 相同的方式标记活细胞。它的最大激发波长为405 nm，与大多数流式细胞仪配备的紫激光线完美匹配，并且可以很好地被荧光显微镜的激发源激发。进入活细胞后，弱荧光钙紫蓝素450 CytoCalcein 450nm激发 会水解成强荧光染料，其激发/发射最大值为 405/450 nm。这种与典型 FACS 荧光团的特殊光谱分离为多重实验提供了额外的选择。与钙黄绿素蓝相比，钙紫蓝素450 Cyt

1.荧光素-dT亚磷酰胺基本参数 CAS 289712-99-8 Ex(nm) 498 Em(nm) 517 分 子 量 1425.58 溶 剂 MeCN 存储条件 保存(＜-15℃)，避免光照 保 质 期 6个月 2.荧光素-dT亚磷酰胺概述 荧光素-dT 亚磷酰胺含有一个 DMT 基团，可以对偶联进行量化。 它可以作为 dT 残基的替代物插入到目标序列中。 它可以将荧光素标签添加到寡核苷酸序列的所需位置。 它与常用的 6-FAM 亚磷酰胺互补，不含 DMT 基团，只能在 5'-末端添加，从而终止合成。我们还提供 HEX-dT 亚磷酰胺、TET-dT 亚磷酰

Cy(Cyanine)染料,也叫花青染料，是一系列在实验中很常见的荧光化合物。跟着百萤一起看看它们是怎么工作的吧！ 1.问：Cy3、Cy5、Cy7是什么？光谱特性如何？适用于哪些应用？ 答：Cy3、Cy5和Cy7是一类荧光染料，常用于生物科学研究中的荧光标记和成像。它们属于氰化染料家族，可以在特定波长下吸收光能，并在不同波长下发射特定颜色的荧光信号。 Cy3的最大吸收波长约为550纳米，最大发射波长约为570纳米；Cy5的最大吸收波长约为650纳米，最大发射波长

免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）是一种利用抗原与抗体之间的专一性为基础，广泛应用于研究蛋白质与蛋白质相互作用的经典研究方法。 原理 如果细胞内两蛋白（A、B）有直接或间接的相互作用时，那么在温和的裂解条件下获得的蛋白样品中加入 A 蛋白的抗体将A蛋白沉淀下来，在细胞内与A蛋白直接相互作用的B蛋白或与其间接相互作用的C蛋白能一起被沉淀下来。使用western blot检测沉淀中是否存在B或C蛋白来确定B或C蛋白与A蛋白的相互作用。 用

1.百萤 链霉亲和素偶联物Cy7-标记工作原理 链霉亲和素偶联物 Cy7-标记是美国AAT Bioquest生产的链霉亲和素，链霉亲和素缀合物与生物素缀合物一起广泛用于特异性检测多种蛋白质，蛋白质基序，核酸和其他分子，因为链霉亲和素对生物素具有非常高的结合亲和力。该Cy7-链霉亲和素缀合物包含链霉亲和素（作为生物素结合蛋白）和共价连接的Cy7（作为荧光标记）。我们的Cy7-链霉亲和素偶联物是使用AAT Bioquest的专有标记技术制备的。与来自其他商业来源的

1.百萤 Cy7羊抗兔免疫球蛋白参数 Ex(nm) 756 Em(nm) 779 分 子 量 ~150000 溶 剂 Water 存储条件 在-15℃以下保存，避免光照 保 质 期 24个月 2.百萤 Cy7羊抗兔免疫球蛋白概述 抗兔二抗是对兔免疫球蛋白具有良好特异性的亲和纯化抗体，可用于检测、分选或纯化其特定靶标。这种Cy7标记的第二抗体是使用AAT Bioquest公司的专利标记技术制备的。与其他商业来源的同类Cy7山羊抗兔leG抗体相比，它显示出更明亮的信号，因此可以显著提高检测灵敏度。二抗提供了更多的通

1.Cy7叠氮化物参数 Ex(nm) 756 Em(nm) 779 分子量 864.95 溶 剂 DMSO 存储条件 保存在(＜-15℃)，避免光照 保质期 12个月 2.Cy7叠氮化物概述 Cy7 叠氮化物是花菁染料Cy7，常被应用于生物分子标记，荧光成像及其他荧光生物分析。他们广泛应用于多肽，蛋白，核苷酸等。Cy7染料在与蛋白质结合后荧光大幅度增强。 图1.氰基7叠氮化合物的化学结构(相当于聚苯胺7) 3.Cy7叠氮化物光谱特性 校正系数(260nm) 0.05 校正系数(280nm) 0.036 校正系数(482nm) 0.0005 校正系数(565nm) 0.0193 校正

1.百萤Tide Fluor 3酸概述 Tide Fluor™ 3 (TF3) 系列的光谱特性与 Cy3 基本相同。与Cy3探针相比，TF3家族具有更强的荧光和更高的光稳定性。此外，它们的荧光在 pH 3 至 11 范围内与 pH 无关。这些特性使这一新染料系列成为 Cy3 的卓越替代品。TF3 标记的肽和核苷酸比 Cy3 标记的肽和核苷酸表现出更强的荧光和更高的光稳定性。与我们的 Tide Quencher™ 3 (TQ3) 配合使用，可以开发多种 FRET 肽和核苷酸，用于检测蛋白酶和分子信标，并提高灵敏度和稳定性。 图1.使用 ED

实时定量PCR也被称为实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR, qPCR)，是一种在DNA扩增反应中加入荧光基团，以荧光信号积累实时监测每次PCR循环后产物总量，进而对待测样品中的目的序列进行定量分析的方法。 基本原理 在学习实时定量PCR数据处理之前，我们首先需要了解一下它的数学原理，Ct值为什么是我们数据处理过程中的一个关键的因素。这两个图显示的是实时定量PCR的一组结果。上图是原始的线性图谱，下图则是处理过的指数图谱，但是它们两者

1.百萤 Cy5酸简介 Cy5,酸（Cy5）常用于荧光成像和其他基于荧光的生化分析。它们广泛用于标记肽，蛋白质和寡核苷酸等。Cy5染料是常见的红色荧光团中的一种。这些多功能荧光团用于生物相关pH的各种应用时可以耐受3-10范围的pH。该染料还具有DMSO耐受性和光稳定性，能够在不损失性能的情况下从储存转移至分析。它的水溶性在测定缓冲液中对有机溶剂的需要。我们的Cy5荧光染料经过QC测试，可确保高水平的发色团和活性染料含量。单活性染料适用于蛋

本人小白，目前利用叶绿体基因组学和hyb-seq获得序列，对植物的系统发育和分类学进行分析研究，现在分析阶段处于下载软件，使用软件都困难的阶段，求大佬手把手指导，有偿！

说明书上写着安全无毒，我们老师也说没什么大事，可是已经一天了，手上还是红色的会不会像eb一样致癌啊，