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科研实验1
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(1)膜没有完全均匀湿透
使用100% methanol浸透膜。
(2)洗膜不充分
增加洗液体积和洗涤次数。
(3)阻断不充分
增加封闭液孵育时间,或者提高温度。选择合适的封闭试剂(脱脂奶粉,BSA,酪蛋白等)。
(3)二抗浓度过高
降低二抗浓度。
(4)检测过程中膜干燥
保证充分的反应液,避免出现干膜现象。
(5)曝光过度
缩短曝光时间。
(6)抗体与阻断蛋白有交叉反应
检测抗体与阻断蛋白的交叉反应性,选择无交叉反应的封闭剂。洗涤液中加入Tween-20可减少交叉反应。
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